Yeni Koronavirüs (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR Kiti
Bu son derece hassas, kullanıma hazır PCR kiti, uzun süreli saklama için liyofilize formatta (dondurarak kurutma işlemi) mevcuttur.Kit, oda sıcaklığında taşınabilir ve saklanabilir ve bir yıl boyunca stabildir.Her bir ön karışım tüpü, Ters transkriptaz, Taq polimeraz, primerler, problar ve dNTP substratları dahil olmak üzere PCR amplifikasyonu için gereken tüm reaktifleri içerir.Sadece 13ul damıtılmış su ve 5ul ekstrakte edilmiş RNA şablonu eklemesi gerekir, daha sonra PCR aletlerinde çalıştırılabilir ve çoğaltılabilir.
qPCR makinesi aşağıdaki gereksinimleri karşılamalıdır:
1. 8 şeritli PCR tüp hacmini 0,2 ml'ye sığdırın
2. Dörtten fazla algılama kanalına sahip olun:
| Kanal | Uyarma (nm) | emisyon (nm) | Ön Kalibre Edilmiş Boyalar |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Yeşil I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-KIRMIZI |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR platformları:
7500Real-Time PCR Sistemi, Biorad CF96, iCycler iQ™ Real-Time PCR Tespit Sistemi, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Novel Coronavirus nükleik asit saptama reaktifinin soğuk zincir taşıma zorluğu
Geleneksel nükleik asit saptama reaktifleri uzun mesafelerde taşındığında, reaktiflerdeki enzimin biyoaktifliğinin aktif kalmasını sağlamak için (-20±5) ℃ soğuk zincir depolaması ve nakliyesi gereklidir.Sıcaklığın standarda ulaştığından emin olmak için, her bir nükleik asit test reaktifi kutusu için 50 g'dan az bile olsa birkaç kilogram kuru buz gerekir, ancak bu sadece iki veya üç gün sürebilir.Endüstri uygulaması perspektifinde, üreticiler tarafından verilen reaktiflerin gerçek ağırlığı, kabın %10'undan (veya bu değerden çok daha azdır) daha azdır.Ağırlığın çoğu kuru buz, buz paketleri ve köpük kutulardan gelir, bu nedenle nakliye maliyeti son derece yüksektir.
Mart 2020'de COVID-19 yurtdışında büyük ölçekte yayılmaya başladı ve Novel Coronavirus nükleik asit saptama reaktifine olan talep çarpıcı bir şekilde arttı.Soğuk zincirdeki reaktifleri ihraç etmenin yüksek maliyetine rağmen, çoğu üretici, büyük miktar ve yüksek kar nedeniyle bunu kabul edebilir.
Bununla birlikte, pandemi karşıtı ürünler için ulusal ihracat politikalarının iyileştirilmesinin yanı sıra, insan ve lojistik akışı üzerindeki ulusal kontrolün yükseltilmesiyle birlikte, reaktiflerin nakliye süresinde uzama ve belirsizlik vardır, bu da önemli ürün sorunlarına neden olmuştur. ulaşım tarafından.Uzatılmış nakliye süresi (yaklaşık yarım aylık nakliye süresi çok yaygındır), ürün müşteriye ulaştığında sık sık ürün arızalarına neden olur.Bu, çoğu nükleik asit reaktifi ihracat işletmelerini rahatsız etti.
PCR reaktifi için liyofilize teknoloji, Novel Coronavirus nükleik asit tespit reaktifinin dünya çapında taşınmasına yardımcı oldu
Liyofilize PCR reaktifleri, sadece nakliye maliyetini azaltmakla kalmayıp aynı zamanda nakliye sürecinden kaynaklanan kalite problemlerini de önleyen oda sıcaklığında taşınabilir ve saklanabilir.Bu nedenle, reaktifi liyofilize etmek, ihracat nakliyesi sorununu çözmenin en iyi yoludur.
Liyofilizasyon, bir çözeltinin katı bir duruma dondurulmasını ve ardından su buharının vakum koşulu altında süblime edilmesini ve ayrılmasını içerir.Kurutulmuş çözünen aynı bileşim ve aktivite ile kapta kalır.Geleneksel sıvı reaktiflerle karşılaştırıldığında, Liming Bio tarafından üretilen tam bileşenli liyofilize Novel Coronavirus nükleik asit saptama reaktifi aşağıdaki özelliklere sahiptir:
Son derece güçlü ısı kararlılığı:60 gün boyunca 56℃'de stand tedavisi ile yapılabilir ve reaktifin morfolojisi ve performansı değişmeden kalır.
Normal sıcaklıkta depolama ve nakliye:soğuk zincire gerek yok, açmadan önce düşük sıcaklıkta saklamaya gerek yok, soğuk depolama alanını tamamen serbest bırakın.
Kullanıma hazır:tüm bileşenlerin liyofilize edilmesi, sistem konfigürasyonuna gerek duyulmaması, enzim gibi yüksek viskoziteli bileşenlerin kaybının önlenmesi.
Bir tüpte multipleks hedefler:tespit hedefi, virüs genovaryasyonunu önlemek için yeni koronavirüs ORF1ab geni, N geni, S genini kapsar.Yanlış negatifliği azaltmak için, numune kalite kontrolüne yönelik klinik ihtiyacı karşılamak üzere dahili kontrol olarak insan RNase P geni kullanılır.
