Bir Dünya Bir Dövüş
Covid-19 Pandemik Zorluğuna Yanıt veren Küresel Bir Ortak Kader Topluluğu İnşa Etme Uluslararası İşbirliği
Dünyada süpürülen yeni koronavirüs, devam eden bir küresel Covid-19 pandemi kriziyle sonuçlandı. Yeni koronavirüsün sınırları yok, Covid-19'a karşı bu savaştan hiçbir ülke kurtulmayacak. Bu dünya çapında Covid-19 pandemisine yanıt olarak, Liming Bio-Products Corp, küresel topluluklarımızın refahını desteklemek için katkıda bulunuyor.
Dünyamız şu anda yeni Coronavirus Hastalığı 2019 (Covid-19) pandemisinin benzeri görülmemiş bir etkisi ile karşı karşıya. Bugüne kadar, bu hastalığın tedavisi için etkili bir ilaç yoktur. Bununla birlikte, Covid-19'un tespiti için birçok tanı testi geliştirilmiştir. Bu testler, yeni koronavirüs spesifik nükleik asit veya antikor biyobelirteçlerini tespit etmek için moleküler veya serolojik yöntemlere dayanmaktadır. Covid-19 bir pandemik duruma ulaştığından, yeni koronavirüs enfeksiyonunun erken teşhisi virüsün yayılmasını değerlendirmede ve onu içermede kritiktir, ancak evrensel kullanım için mükemmel bir test henüz mevcut değildir. COVID-19 enfeksiyonunun taranması, teşhisi ve izlenmesi için hangi testlerin potansiyel olarak kullanılabileceğini ve sınırlamaları neler olduğunu bilmeliyiz. Bu bilimsel araçların nasıl daha iyi kullanılacağı ve bu hızla yayılan ve ciddi hastalığın ortaya çıkışını tanımlamaya ve kontrol etmeye nasıl yardımcı olmak çok önemlidir.
Yeni koronavirüsün tespitinin amacı, covid-19 enfeksiyonu olan bir bireyin mi yoksa virüsü sessizce yayabilen asimptotik bir taşıyıcı mı, klinik tedavi için karar vermeye rehberlik etmek için temel bilgiler sağlamaktır. Önceki çalışmalar klinik kararların% 70'inin test sonuçlarına bağlı olduğunu göstermiştir. Farklı algılama yöntemleri kullanıldığında, algılama reaktif kitlerinin gereksinimleri de farklıdır.
Şekil 1
Şekil 1:Covid-19 enfeksiyonunun tipik zaman seyri sırasında genel biyobelirteç seviyelerinin temel aşamalarını gösteren diyagram. X ekseni enfeksiyon gün sayısını gösterir ve Y ekseni, farklı dönemlerde viral yükü, antijen konsantrasyonunu ve antikor konsantrasyonunu gösterir. Antikor, IgM ve IgG antikorlarını ifade eder. Hem RT-PCR hem de antijen tespiti, erken hasta tespiti için doğrudan kanıt olan yeni koronavirüs varlığını veya yokluğunu tespit etmek için kullanılır. Viral enfeksiyondan bir hafta sonra PCR tespiti veya antijen tespiti tercih edilir. Yaklaşık 7 gün boyunca yeni koronavirüs enfeksiyonundan sonra, yeni koronavirüse karşı IgM antikoru hastanın kanında kademeli olarak artmıştır, ancak varlığın süresi kısadır ve konsantrasyonu hızlı bir şekilde azalır. Buna karşılık, virüse karşı IgG antikoru, genellikle virüs enfeksiyonundan yaklaşık 14 gün sonra, daha sonra ortaya çıkar. IgG konsantrasyonu yavaş yavaş artar ve kanda uzun bir süre devam eder. Böylece, IgM hastanın kanında tespit edilirse, virüsün yakın zamanda enfekte olduğu anlamına gelir, bu da erken bir enfeksiyon belirtecidir. IgG antikoru hastanın kanında tespit edildiğinde, viral enfeksiyonun bir süredir olduğu anlamına gelir. Geç enfeksiyon veya önceki enfeksiyon da denir. Genellikle iyileşme aşamasında olan hastalarda görülür.
Yeni koronavirüsün biyobelirteçleri
Yeni koronavirüs, proteinlerden ve nükleik asitlerden oluşan bir RNA virüsüdür. Virüs, konak (insan) gövdesini istila eder, hücrelere karşılık gelen reseptör ACE2'yi bağlama yoluyla girer ve konakçı hücrelerde çoğalır, bu da insan bağışıklık sisteminin yabancı istilacılara yanıt vermesine ve spesifik antikorlar üretmesine neden olur. Bu nedenle, flakon nükleik asitler ve antijenler ve yeni koronavirüse karşı spesifik antikorlar teorik olarak yeni koronavirüsün tespiti için spesifik biyobelirteçler olarak kullanılabilir. Nükleik asit tespiti için, RT-PCR teknolojisi en yaygın olarak kullanılan, serolojik yöntemler yeni koronavirüse özgü antikorların saptanması için yaygın olarak kullanılır. Şu anda, COVID-19 enfeksiyonunu test etmek için seçebileceğimiz çeşitli test yöntemleri mevcuttur [1].
Yeni koronavirüs için ana test yöntemlerinin temel ilkeleri
COVID_19 için birçok teşhis testi şimdiye kadar mevcuttur ve daha fazla test kiti her gün acil kullanım yetkisi altında onay alır. Her ne kadar birçok farklı isim ve formatla ortaya çıkan yeni test gelişmeleri olsa da, mevcut COVID_19 testlerinin tümü temel olarak iki ana teknolojiye dayanmaktadır: viral RNA için nükleik asit tespiti ve viral spesifik antikorları (IGM ve IgG) tespit eden serolojik immünoanalizler.
01. Nükleik asit tespiti
Ters transkripsiyon-polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR), döngü aracılı izotermal amplifikasyon (lamba) ve yeni nesil sekanslama (NGS), yeni koronavirüs RNA'nın saptanması için yaygın nükleik asit yöntemleridir. RT-PCR, hem Dünya Sağlık Örgütü (WHO) hem de ABD Hastalık Kontrol ve Önleme Merkezi (CDC) tarafından önerilen Covid-19 için ilk test türüdür.
02. Serolojik Antikor Tespiti
Antikor, virüs enfeksiyonuna yanıt olarak insan vücudunda üretilen koruyucu bir proteindir. IGM erken bir antikor tipidir, oysa IgG daha sonraki tip bir antikordur. Serum veya plazma örneği genellikle Covid-19 enfeksiyonunun akut ve iyileşen fazlarının değerlendirilmesi için antikorun spesifik IgM ve IgG tiplerinin varlığı açısından incelenir. Bu antikor bazlı tespit yöntemleri arasında kolloidal altın immünokromatografi deneyi, lateks veya floresan mikroküre immünokromatografisi, enzime bağlı immünosorban deneyi (ELISA) ve kemilüminesans testi bulunur.
03.viral antijen tespiti
Antijen, insan vücudu tarafından tanınan virüs üzerinde, virüsü kan ve dokulardan temizlemek için antikorlar üretmek üzere bağışıklık savunma sistemini tetikleyen bir yapıdır. Virüs üzerinde bulunan viral bir antijen, immünoanaliz kullanılarak hedeflenebilir ve tespit edilebilir. Viral RNA gibi, viral antijenler de enfekte olmuş bireylerin solunum yolunda bulunur ve Covid-19 enfeksiyonunun akut fazını teşhis etmek için kullanılabilir. Bu nedenle, ilk antijen testi için tükürük, nazofaringeal ve orofaringeal sürüntü, derin öksürük balgam, bronkoalveolar lavaj sıvısı (BALF) gibi üst solunum örneklerinin toplanması genellikle önerilir.
Yeni koronavirüs için test yöntemlerinin seçilmesi
Bir test yönteminin seçilmesi, klinik ortam, kalite kontrolü, geri dönüş süresi, test maliyetleri, örnekleme toplama yöntemleri, laboratuvar personeli teknik gereksinimleri, tesis ve ekipman gereksinimleri gibi birçok faktör içerir. Nükleik asitlerin veya viral antijenlerin saptanması, virüslerin varlığına dair doğrudan kanıt sağlamak ve yeni koronavirüs enfeksiyonu tanısını doğrulamaktır. Antijen tespiti için birçok yöntem olmasına rağmen, yeni koronavirüsün tespit duyarlılığı teorik olarak RT-PCR amplifikasyonundan daha düşüktür. Antikor testi, insan vücudunda üretilen, zaman içinde geciken ve genellikle virüs enfeksiyonunun akut fazı sırasında erken tespit için kullanılamayan anti-virüs antikorlarının saptanmasıdır. Tespit uygulamaları için klinik ortam değişebilir ve örnek toplama alanları da farklı olabilir. Viral nükleik asitlerin ve antijenlerin tespiti için, örnekin virüsün bulunduğu solunum yolunda, nazofaringeal sürüntü, orofaringeal swab, balgam veya bronkoalveoler lavaj sıvısı (BALF) gibi toplanması gerekir. Antikor bazlı tespit için, spesifik anti-virüs antikorunun (IgM/IgG) varlığı için kan örneğinin toplanması ve incelenmesi gerekir. Bununla birlikte, antikor ve nükleik asit testi sonuçları birbirini tamamlayabilir. Örneğin, test sonucu nükleik asit-negatif, IgM-negatif ancak IgG-pozitif olduğunda, bu sonuçlar hastanın şu anda virüsü taşımadığını, ancak yeni koronavirüs enfeksiyonundan geri kazanıldığını gösterir. [2]
Yeni koronavirüs testlerinin avantajları ve dezavantajları
Yeni koronavirüs pnömonisi için tanı ve tedavi protokolünde (deneme versiyonu 7) (3 Mart 2020'de geleneksel Çin tıbbının ulusal sağlık komisyonu ve devlet yönetimi tarafından piyasaya sürüldü), nükleik asit testi, romanın teşhisi için altın standart yöntem olarak kullanılır. Koronavirüs enfeksiyonu, antikor testi de tanı için doğrulama yöntemlerinden biri olarak kabul edilir.
Patojenik ve serolojik bulgular
(1) Patojenik Bulgular: RT-Prand/veya NGS yöntemleri kullanılarak nazofaringeal swab, balgam, alt solunum yolu sekresyonları, kan, dışkı ve diğer örneklerde yeni koronavirüs nükleik asit tespit edilebilir. Örneklerin alt solunum yolundan (balgam veya hava yolu ekstraksiyonu) elde edilmesi daha doğrudur. Örnekler, toplandıktan sonra mümkün olan en kısa sürede test için gönderilmelidir.
(2) Serolojik Bulgular: NCP virüsüne özgü IgM, başlangıçtan yaklaşık 3-5 gün sonra tespit edilebilir; IgG, akut faza kıyasla iyileşme sırasında en az 4 kat artışa ulaşır.
Bununla birlikte, test yöntemlerinin seçimi coğrafi konumlara, tıbbi düzenlemelere ve klinik ortamlara bağlıdır. ABD'de NIH, Coronavirus Hastalığı 2019 (COVID-19) tedavi kılavuzları (site güncellendi: 21.2020) ve FDA, Halk Sağlığı Acil Durumu Sırasında Halk Sağlığı Acil Durumu Sırasında Verilen Koronavirüs Hastalığı-2019 için Teşhis Testleri için Politika yayınladı. ), IgM/IgG antikorlarının serolojik testlerinin sadece bir tarama testi olarak seçildiği.
Nükleik asit tespit yöntemi
RT_PCR, yeni koronavirüs RNA'sının solunum veya diğer örneklerde mevcut olup olmadığını tespit etmek için tasarlanmış oldukça hassas bir nükleik asit testidir. Pozitif bir PCR testi sonucu, COVID-19 enfeksiyonunu doğrulamak için numunede yeni koronavirüs RNA varlığı anlamına gelir. Negatif bir PCR testi sonucu, virüs enfeksiyonunun olmaması anlamına gelmez, çünkü geri kazanılan fazda kötü örnek kalitesi veya hastalık zaman noktasından etkilenebilir. RT-PCR oldukça hassas bir test olmasına rağmen, birkaç dezavantajı vardır. RT-PCR testleri işgücü yoğun ve zaman alıcı olabilir, önemli ölçüde numunenin yüksek kalitesine bağlıdır. Bu bir zorluk olabilir, çünkü viral RNA miktarı sadece farklı hastalar arasında muazzam bir şekilde değişmekle kalmaz, aynı zamanda örnek toplandığı zaman noktalarına ve enfeksiyon aşamalarına veya klinik semptomların başlangıcına bağlı olarak aynı hasta içinde değişebilir. Yeni koronavirüsün tespit edilmesi, yeterli miktarda sağlam viral RNA içeren yüksek kaliteli örnekler gerektirir.
RT-PCR testi, COVID-19 enfeksiyonu olan bazı hastalar için yanlış negatif bir sonuç (yanlış negatif) verebilir. Bildiğimiz gibi, yeni koronavirüsün ana enfeksiyon bölgeleri akciğerde ve alveol ve bronş gibi alt solunum yolunda bulunur. Bu nedenle, derin bir öksürük veya bronkoalveoler lavaj sıvısı (BALF), viral tespit için en yüksek hassasiyete sahip olduğu düşünülen balgam örneği. Bununla birlikte, klinik uygulamada, örnekler genellikle nazofaringeal veya orofaringeal sürüntüler kullanılarak üst solunum yolundan toplanır. Bu örnekleri toplamak sadece hastalar için rahatsız olmakla kalmaz, aynı zamanda özel olarak eğitilmiş personel gerektirir. Örneklemeyi daha az invaziv veya daha kolay hale getirmek için, bazı durumlarda hastalara oral bir sürüntü verilebilir ve bukkal mukozadan veya dilin kendilerinden bir örnek almalarına izin verilebilir. Yeterli viral RNA olmadan, RT-QPCR yanlış negatif bir test sonucu döndürebilir. Çin, Hubei eyaletinde, ilk tespitte RT-PCR hassasiyeti sadece%30-50, ortalama%40 ile bildirilmiştir. Yüksek yanlış negatif oranı büyük olasılıkla yetersiz örneklemeden kaynaklanmıştır.
Ek olarak, RT-PCR testi, karmaşık RNA ekstraksiyon aşamaları ve PCR amplifikasyon prosedürü gerçekleştirmesi için yüksek eğitimli personel gerektirir. Ayrıca daha yüksek düzeyde biyogüvenlik koruması, özel laboratuvar tesisi ve gerçek zamanlı PCR aleti gerektirir. Çin'de, COVID-19 tespiti için RT-PCR testinin biyogüvenlik seviye 2 laboratuvarlarında (BSL-2), biyogüvenlik seviye 3 (BSL-3) uygulaması kullanılarak personel koruması ile gerçekleştirilmesi gerekmektedir. Bu gereksinimler altında, Ocak ayının başından Şubat 2020'nin başlarına kadar, Çin Wuhan'ın CDC laboratuvarının kapasitesi günde sadece birkaç yüz vakayı tespit edebildi. Normalde, diğer bulaşıcı hastalıkları test ederken bu bir sorun olmaz. Bununla birlikte, potansiyel olarak milyonlarca insanın test edileceği Covid-19 gibi küresel bir pandemiyle uğraşırken, RT-PCR özel laboratuvar tesisleri veya teknik ekipman gereksinimleri nedeniyle kritik bir sorun haline gelir. Bu dezavantajlar, tarama için etkili bir araç olarak kullanılacak RT-PCR'yi sınırlayabilir ve ayrıca test sonuçlarının raporlarında gecikmelere yol açabilir.
Serolojik antikor tespit yöntemi
Hastalık seyrinin ilerlemesi ile, özellikle orta ve geç aşamalarda, antikor tespit oranı çok yüksektir. Wuhan Central South Hastanesi'nde yapılan bir araştırma, antikor tespit oranının Covid-19 enfeksiyonunun üçüncü haftasında% 90'dan fazla ulaşabileceğini gösterdi. Ayrıca, antikor yeni koronavirüse karşı insan bağışıklık tepkisinin ürünüdür. Antikor testi, RT-PCR'ye göre çeşitli avantajlar sunar. İlk olarak, serolojik antikor basit ve hızlı test eder. Antikor lateral akış testleri, bakım noktası için 15 dakikada bir sonuç vermek için kullanılabilir. İkincisi, serolojik test tarafından tespit edilen hedef, viral RNA'dan çok daha kararlı olduğu bilinen antikordur. Toplama, taşıma, depolama ve test sırasında, antikor testleri için örnekler genellikle RT-PCR örneklerinden daha kararlıdır. Üçüncüsü, antikor kan dolaşımında eşit olarak dağıldığından, nükleik asit testine kıyasla daha az örnekleme varyasyonu vardır. Antikor testi için gerekli örnek hacmi nispeten küçüktür. Örneğin, antikor lateral akış testinde 10 mikrolitre parmak vergisi kanının kullanılması yeterlidir.
Genel olarak, antikor testi, hastalık kursları sırasında yeni koronavirüsün tespit oranını iyileştirmek için nükleik asit tespiti için bir ek aracı olarak seçilir. Antikor testi bir nükleik asit testi ile birlikte kullanıldığında, potansiyel yanlış pozitif ve yanlış negatif sonuçları azaltarak COVID19 tanısı için test doğruluğunu artırabilir. Mevcut çalışma kılavuzu, bağımsız bir algılama biçimi olarak iki tip test kullanılmasını önermez, ancak birleşik bir format olarak kullanılmalıdır. [2]
Şekil 2:Yeni koronavirüs enfeksiyonunun saptanması için nükleik asit ve antikor test sonuçlarının doğru yorumu
Şekil 3:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Yeni Coronavirus IGM/IgG Antikoru Çift Hızlı Test Kiti (StrongStep®SARS-COV-2 IGM/IgG antikoru hızlı testi, lateks immünokromatografi)
Şekil 4:Liming Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Yeni koronavirüs (SARS-COV-2) multipleks gerçek zamanlı PCR kiti (üç gen için tespit, floresan prob yöntemi).
Not:Bu son derece hassas, kullanıma hazır PCR kiti, uzun süreli depolama için liyofilize formatta (dondurucu kurutma işlemi) mevcuttur. Kit oda sıcaklığında taşınabilir ve saklanabilir ve bir yıl boyunca sabittir. PREMIX'in her tüpü, ters transkriptaz, Taq polimeraz, primerler, problar ve DNTPS substratları dahil PCR amplifikasyonu için gereken tüm reaktifleri içerir. amplifikasyonu çalıştırmak için bir PCR aletine.
Yeni koronavirüs salgına yanıt olarak, Liming Bio-Products Co., Ltd., klinik ve halk sağlığı laboratuvarlarının COVID-19 enfeksiyonunu hızlı bir şekilde teşhis etmesini sağlamak için iki teşhis kiti geliştirmek için hızla çalıştı. Bu kitler, yeni koronavirüs salgınının hızla yayıldığı ülkelerde ve bölgelerde büyük ölçekli tarama için kullanım için çok uygundur ve Covid-19 enfeksiyonu için teşhis ve onay sağlamak için. Bu kitler sadece önceden bildirilmiş acil kullanım yetkisi (PEUA) altında kullanılmaktadır. Test, ulusal veya yerel makamların düzenlemeleri uyarınca sertifikalı laboratuvarlarla sınırlıdır.
Antijen algılama yöntemi
1. Viral antijen tespiti, nükleik asit tespiti ile aynı doğrudan saptama kategorisinde sınıflandırılır. Bu doğrudan tespit yöntemleri, örnekte viral patojenlerin kanıtını arar ve doğrulama tanısı için kullanılabilir. Bununla birlikte, antijen tespit kitlerinin gelişimi, güçlü afinite ve patojenik virüsleri tanıyabilen ve yakalayabilen yüksek hassasiyete sahip yüksek kaliteli monoklonal antikorlar gerektirir. Antijen tespit kitinin hazırlanmasında kullanılmak üzere uygun bir monoklonal antikoru seçmek ve optimize etmek genellikle altı aydan fazla sürer.
2. Şu anda, yeni koronavirüsün doğrudan tespiti için reaktifler hala araştırma ve geliştirme aşamasındadır. Bu nedenle, hiçbir antijen tespit kiti klinik olarak doğrulanmamıştır ve ticari olarak temin edilmemiştir. Daha önce Shenzhen'deki bir teşhis firmasının bir antijen tespit kiti geliştirdiği ve İspanya'da klinik olarak test ettiği bildirilmiş olsa da, tahlil güvenilirliği ve doğruluğu reaktif kalite sorunlarının varlığı nedeniyle doğrulanamadı. Bugüne kadar, NMPA (eski Çin FDA) henüz klinik kullanım için herhangi bir antijen tespit kitini onaylamamıştır. Sonuç olarak, çeşitli tespit yöntemleri geliştirilmiştir. Her yöntemin avantajları ve sınırlamaları vardır. Doğrulama ve tamamlayıcı için farklı yöntemlerden elde edilen sonuçlar kullanılabilir.
3. Kaliteli bir Covid-19 test kiti üretmek, araştırma ve geliştirme sırasında optimizasyona güçlü bir şekilde bağlıdır. Liming Bio-Product Co., Ltd. Test kitlerinin, en yüksek performans ve tutarlılık seviyelerini sağladıklarından emin olmak için katı üretim ve kalite kontrol standartlarını karşılaması gerekmektedir. Liming Bio-Product Co., Ltd.'deki bilim adamları, analitik nicelemede en yüksek performans seviyesini sağlamak için in vitro teşhis kitlerini tasarlama, test etme ve optimize etme konusunda yirmi yılı aşkın deneyime sahiptir.
Covid-19 pandemi sırasında Çin hükümeti, uluslararası sıcak noktalarda salgın önleme malzemelerine olan büyük talebin artmasıyla karşılaştı. 5 Nisan'da, Bakanlığın Dış Ticaret Departmanı'nın ilk seviye müfettişi olan Jiang Fan, "Tıbbi Materyallerin Kalite Yönetimini Güçlendirme ve Piyasanın Düzenlenmesi" Dışında Devlet Konseyi Ortak Önleme ve Kontrol Mekanizması Basın Konferansı'nda Ticaret, "Daha sonra, ilk olarak, uluslararası toplumun ihtiyaç duyduğu daha fazla tıbbi malzemenin desteğini hızlandırmak ve ayrıca ürünlerin kalite kontrolünü, düzenlemesini ve yönetimini iyileştirmek için çabalarımızı iki yöne odaklayacağız. Çin'in küresel salgına ortaklaşa yanıt vermeye ve insanlık için ortak bir geleceğe sahip bir topluluk oluşturmaya katkısını yapacağız.
Şekil 5:Liming Bio-Products Co., Ltd.'nin yeni Coronavirus Reaktifi AB CE Kayıt Sertifikası aldı
Onursal Sertifika
Houshenshan
Şekil 6. Liming Bio-Products Co., Ltd., Covid-19 salgına karşı savaşmak için Wuhan Vulcan (Houshenshan) Dağ Hastanesi'ni destekledi ve Wuhan Kızıl Haç Onursal Sertifikası aldı. Wuhan Vulcan Mountain Hastanesi, Çin'in şiddetli Covid - 19 hasta tedavisinde uzmanlaşmış en ünlü hastanesidir.
Yeni koronavirüs salgını dünyaya yayılmaya devam ederken, Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd., bu eşi görülmemiş küresel tehdidi mücadele etmek için yenilikçi teknolojilerimizle dünya çapında toplulukları desteklemek ve yardımcı olmak için adım atıyor. Covid-19 enfeksiyonunun hızlı testi, bu tehdide değinmenin kritik bir parçasıdır. İnsanların ihtiyaç duydukları kritik test sonuçlarını alabilmeleri için cephe sağlık çalışanlarının ellerine yüksek kaliteli teşhis platformları sağlayarak önemli bir şekilde katkıda bulunmaya devam ediyoruz. Liming Bio-Products Co., Ltd.'nin Covid-19 pandemisine karşı savaştaki çabaları, küresel bir kader topluluğunun inşası için uluslararası topluluklara teknolojilerimize, deneyimlerimize ve uzmanlığımıza katkıda bulunmaktır.
Uzun basın ~ tarayın ve bizi takip edin
E -posta: sales@limingbio.com
Web sitesi: https://limingbio.com
Gönderme Zamanı: Mayıs-01-2020
